ゲノム編集ツール『GENOME CRAFT RNA』1708

『GENOME CRAFT RNA』は、CRISPR/CAS系のゲノム編集技術における高効率で簡易なノックイン/ノックアウトを実現する好適なツールです。
ゲノム編集技術として急速に普及しているCRISPR/Cas9システムですが、ターゲット配列ごとに特異的なRNAが必要です。
『GENOME CRAFT RNA』なら、お手持ちのCas9とミックスして細胞に導入するだけで、簡単にゲノム編集が実現できます。
ゲノム編集の作業効率化に是非ご活用ください。

【特徴】
○わずらわしい発現ベクター構築や気を遣うRNA調製作業が不要
[GENOME CRAFT TYPE SG]
○酵素合成によるsgRNAの作製
→in vitro転写反応にてsgRNAを合成
[GENOME CRAFT TYPE CT]
○化学合成によるcrRNAおよびtracrRNAの作製
→化学合成したcrRNAとtracrRNAを用いることでsgRNAと同様に使用できる

詳しくはお問い合わせ、またはカタログをダウンロードしてください。 （詳細を見る）

『Genome Craftシリーズ』は、自由な遺伝子改変を可能にするパワフルな
ゲノム編集ツールです。

「Genome Craft Type CT」は、化学合成したcrRNAとtracrRNAを
用いることでsgRNAと同様に使用でき、一本の長いsgRNAを二つに
分割することで、化学合成が可能となりました。

当社では、CRISPR/CAS系のゲノム編集技術における高効率なノックイン/
ノックアウトを実現する好適なツールをご提供いたしております。

【ラインアップ】
■ガイドRNA
・Genome Craft Type CT
・Genome Craft Type SG
■Recombinant Cas9
■ドナーDNA

※詳しくはPDF資料をご覧いただくか、お気軽にお問い合わせ下さい。 （詳細を見る）

ゲノム編集技術として急速に普及している CRISPR/Cas9 システムですが、
ターゲット配列ごとに特異的なRNAが必要です。

ファスマックの『GENOME CRAFT RNA』なら、お手持ちのCas9とミックスして
細胞に導入するだけで、簡単にゲノム編集が実現可能。

わずらわしい発現ベクター構築や気を遣うRNA調製作業はもう要りません。
ゲノム編集の作業効率化に是非ご活用ください。

【特長】
■より簡単により多くのターゲットにアプローチできる
■発現ベクター構築や気を遣うRNA調製作業は不要
■お手持ちのCas9とミックスして細胞に導入するだけで、
　簡単にゲノム編集が実現可能
■化学合成したcrRNAとtracrRNAを用いることで
　CRISPR/CasシステムのガイドRNAとして機能する

※詳しくはPDF資料をご覧いただくか、お気軽にお問い合わせ下さい。 （詳細を見る）

『GenomeCraft　Cas9』は、N末端とC末端の両方に核移行シグナルが
付いたStreptococcus pyogenes由来のCas9タンパク質です。

CRISPR/Casによるゲノム編集で良く使用されている2本鎖切断型
「Cas9タンパク質」と、ターゲット配列のアンチセンス鎖(PAM nGGの相補鎖)
のみを切断する1本鎖切断型「Cas9 D10Aニッケース」をご用意。

マイクロインジェクション、エレクトロポレーション、リポフェクション等で
細胞へ導入してのゲノム編集やin vitroでのDNA切断実験等にお使いいただけます。

【ラインアップ】
■Cas9タンパク質
・GE-005-S（容量：100μg）
・GE-005-L（容量：100μg x3）
■Cas9 D10Aニッケース
・GE-006-S（容量：100μg）
・GE-006-L（容量：100μg x3）

※詳しくはPDF資料をご覧いただくか、お気軽にお問い合わせ下さい。 （詳細を見る）

当社が取り扱う、ゲノム編集ツール『GenomeCraft‐ドナーDNA』をご紹介します。

「ssODN(一本鎖オリゴドナーDNA)合成」では、塩基置換やloxPサイト等、
数十塩基までの配列をノックインするドナーDNAとしてご利用可能。

「ssDNA(一本鎖DNA)作製」では、オリゴDNA合成では対応できない長鎖の
一本鎖DNAを作製し、「ターゲティングベクター作製」では、遺伝子ノックアウトや
ノックイン等、遺伝子ターゲティング用のドナーDNAを作製いたします。

ご用命の際は、お気軽にお問い合わせください。

【サービス内容】
■ssODN(一本鎖オリゴドナーDNA)合成
■ssDNA(一本鎖DNA)作製
■ターゲティングベクター作製

※詳しくはPDF資料をご覧いただくか、お気軽にお問い合わせ下さい。 （詳細を見る）

ゲノム編集ツール『GenomeCraft』の使用事例をご紹介します。

“ダブルノックアウト(ゼブラフィッシュ)”への使用では、Cas9蛋白質と
2つの遺伝子に対するsgRNA又はGENOME CRAFT Type CTを混合し、
ゼブラフィッシュ胚にインジェクションして、発生の様子を観察。

受精1日後にGFPで染色された心臓の形成異常が、2日後には目の色素
形成異常が観察されました。

この他、 “In vitro digestion assay”や“In vivo Genome Editing”
“遺伝子ノックイン(マウス)”での使用事例もございます。

【In vitro digestion assay　使用事例】
■実験内容
・Cas9蛋白質とsｇRNA又はcrRNA+tracrRNA、基質DNA断片を混合し、
　DNA切断実験を行った
■結果：バンドのシフトが確認されたことから、sgRNA、
　crRNA+tracrRNAとも良好なDNA切断活性を確認

※詳しくはPDF資料をご覧いただくか、お気軽にお問い合わせ下さい。 （詳細を見る）

『RAISING法』は、ゲノム中の外来DNAの挿入位置を検出する方法です。
少ないDNA量で再現性の高い測定結果がスピーディーに得られます。

ウイルスゲノム挿入部位、ウイルスベクター挿入部位、
創薬ターゲットとなりうる融合遺伝子の検索、
ゲノム編集におけるオフターゲットノックインなど、
外来DNAのホストゲノム上の挿入位置の同定ができます。

【特長】
■目的・ターゲットにあわせて解析のアレンジが可能
■一度の解析で複数の挿入部位を検出可能
■独自技術により再現性の高い結果が得られる

【解析事例】
◎HTLV-1（ヒトT細胞白血病ウイルス）クロナリティ解析
少ないDNA量で素早く検出できるRAISING法の特長を活かし、
プロウイルス量0.032％でも高い検出感度を実現しています。

◎ゲノム編集におけるノックインのオフターゲット検出
CRISPR/Casで作製したノックインマウスについて、NGSとの組み合わせにより
ノックイン効率とオフターゲットサイトの検出を行いました。

※事例やサービスの詳細は「ダウンロード」から資料をご覧ください。 （詳細を見る）

ゲノム編集ツールである『Genome Craft』の使用例をご紹介します。

Cas9蛋白質とsgRNA又はcrRNA+tracrRNA、基質DNA断片を混合し、
DNA切断実験を行いました。37℃にて1時間インキュベート後、
アガロースゲル電気泳動を実施。

バンドのシフトが確認されたことから、sgRNA、crRNA+tracrRNAとも
良好なDNA切断活性が確認されました。

この他に、「In vivo Genome Editing」や「ダブルノックアウト」や
「遺伝子ノックイン(マウス)」などの使用例もあります。

【使用例】
■In vitro digestion assay
■In vivo Genome Editing
■ダブルノックアウト(ゼブラフィッシュ)
■遺伝子ノックイン(マウス)

※詳しくはPDF資料をご覧いただくか、お気軽にお問い合わせ下さい。 （詳細を見る）

『Cas9 タンパク質』は、CRISPR/Casによるゲノム編集で良く使用されている
2本鎖切断型です。

保存温度は-20℃以下。容量が100μgの「GE-005-S」と、100μg x3の
「GE-005-L」をラインアップしています。

当社では、CRISPR/CAS系のゲノム編集技術における高効率なノックイン/
ノックアウトを実現する好適なゲノム編集ツール「Genome Craftシリーズ」を
ご提供いたしております。

【特長】
■CRISPR/Casによるゲノム編集で良く使用されている2本鎖切断型
■保存温度：-20℃以下(長期保管は-80℃推奨)
■保存バッファー：10mM Tris-HCl(PH7.5), 300mM NaCl, 0.1mM EDTA,
　1mM DTT, 50％Glycerol
■タンパク質由来：Recombinant E. coli

※詳しくはPDF資料をご覧いただくか、お気軽にお問い合わせ下さい。 （詳細を見る）

ファスマックでは、『長鎖RNA合成』を承っております。

鋳型DNA(プラスミドクローンからPCRで調製したもの、又はオリゴDNA)から
T7ポリメラーゼによるin vitro 転写による合成を行い、シリカカラム精製後、
吸光度測定と電気泳動で純度と収量を確認します。

RT-PCRの増幅コントロールRNA、ゲノム編集用のgRNA、small-RNA、mRNA調製、
RNAアプタマー等、いろいろな用途に応じてご希望の配列をご連絡ください。

【RNA使用例】
■GFP遺伝子配列のRNAを合成して5’cap、polyA-tailを付加後、
　リポフェクション法により培養細胞に導入
■導入後5時間程度で緑色の蛍光が観察できた

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